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超分辨顯微鏡主要依賴熒光標記的樣品進行成像

更新時間:2026-01-27      點擊次數:19
  超分辨顯微鏡是一種能夠突破傳統光學顯微鏡分辨率極限的先進顯微技術,以下是其基本工作原理和優點。
 
  1.基于熒光成像:主要依賴熒光標記的樣品進行成像。樣品中的熒光分子在特定波長的光激發下會發出熒光,通過檢測這些熒光信號來獲取樣品的圖像信息。
 
  2.克服衍射極限:傳統光學顯微鏡的分辨率受到光的衍射極限限制,而超分辨顯微鏡通過各種技術手段巧妙地繞過了這一限制。例如,結構光照明顯微術(SIM)利用光的干涉條紋照亮樣品,使熒光分子產生高頻信息,再通過計算重構獲得超分辨圖像;受激發射損耗顯微鏡(STED)則采用一束中心波長為λ的激光聚焦到樣品上,同時用另一束波長為λdep的激光包圍第一束激光,使周邊區域的熒光分子發生受激發射損耗而不發光,只保留中心極小區域內的熒光發射,從而提高分辨率。
 
  3.單分子定位與追蹤:一些超分辨技術如單分子定位顯微鏡(SMLM),通過控制熒光分子的開關狀態,實現對單個分子的高精度定位和追蹤。多次重復這個過程,就能構建出超分辨的圖像。
 
  超分辨顯微鏡的使用注意事項:
 
  1.操作規范
 
  -小心操作:在使用顯微鏡時,要遵循正確的方法,例如在移動儀器時要一只手握鏡臂,一只手扶鏡座,兩上臂緊靠胸壁,切勿用一只手斜提,前后擺動,以防鏡頭或其他零件跌落。
 
  -距離把控:在觀察標本時,顯微鏡離實驗臺邊緣應保持一定距離,以免顯微鏡翻倒落地。鏡柱與鏡臂間的傾斜角度不得超過45度,用完立即還原。
 
  2.環境要求
 
  -穩定放置:顯微鏡要放在一個平穩的地方,當實驗室或實驗臺的振動太大時,可以用某種穩健的臺子來安置顯微鏡。
 
  -控制溫濕度:保持適宜的環境溫度和濕度,避免因溫濕度變化影響顯微鏡性能和樣品狀態。
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